Öncelikle, çizilen dairenin deneysel sonuçlardan türediğine dikkat edilmelidir. Belirli oksijenleri işaretlerseniz, ör. normal $ \ ce {^ 16O} $ span yerine radyoaktif $ \ ce {^ 18O} $ ekleyerek >, ester ürününün $ \ ce {^ 18O} $ içerip içermeyeceğini ve nerede bulunmayacağını ve suyun $ \ ce {^ 18O} $ veya değil.
$$ \ begin {align} \ ce {R-CO-OH + HO {*} - R &< = >> R-CO-O {*} - R + H2O} \\ [0.5em] \ ce {R-CO {*} - O {*} H + HO-R &< = >> R-CO {*} - OR + H2O {*}} \ end {align} $$
Neden bunun olmasının nedeni reaksiyon mekanizmasıdır. Mekanizmanın ilk adımı, alkol oksijenin $ \ ce {C = O} $ çift bağına nükleofilik saldırısıdır ve $ \ ce {O -} $ , $ \ ce {OH} $ ve $ \ ce {HOR +} $ 'ın tümü tek bir karbona bağlıdır. Bu, $ \ ce {C = O} $ bağının oluşması ve bir grubun çıkarılmasıyla bozulur. $ \ ce {HOR +} $ çıkarılırsa, başlangıç materyalleri yeniden oluşturulur. $ \ ce {OH -} $ çıkarılırsa, proton transferinden sonra ester ürünü oluşturulur.
Bu mekanizma içinde, alkollü $ \ ce {C-O} $ tahviline hiçbir zaman bir saldırı yoktur, bu yüzden kırılamaz. Ayrıca, $ \ ce {OH- yer değiştirmesi altında bir $ \ ce {CO} $ bağını kırmak oldukça zordur. yine de} $ . Ester oluşumunda çalışmasının tek nedeni, aynı zamanda $ \ ce {C = O} $ 'ın gerekli enerjiyi sağlayacak şekilde yeniden oluşturulmasıdır.